共聚焦激光顯微鏡
編輯共聚焦激光顯微鏡是一種可以重建高分辨率圖像和三維信息的顯微鏡。共聚焦顯微鏡(共焦顯微術的主要特點)的焦距是被獲得的圖像無模糊甚至厚的樣品,使得散架。為每個分鐘點拍攝一幅圖像,然后由計算機對其進行重構以獲得完整圖像。其原理共聚焦顯微鏡的本身馬文·明斯基但被那些在1953年開發的,作為光源接近理想的激光通過是廣義共聚焦“激光”顯微鏡在20世紀80年代到最后波及變成了。除法線點掃描類型外,還有一種使用Nipkow磁盤進行掃描的方法。
成像系統
編輯在共焦激光顯微鏡中,激光束從光源的開口發射,用物鏡聚焦在樣品上,并獲得從樣品發射的熒光。物鏡再次收集熒光和反射激光的混合光。混合的光由分束器分離,并且激光反射的光通過,僅將熒光發送到檢測設備。穿過針孔的熒光由光電檢測裝置(光電倍增管或雪崩光電二極管)檢測,并將光信號轉換為電信號并記錄在計算機中。
檢測裝置的針孔防止從聚焦位置發射的熒光以外的光進入內部。結果,在具有厚度的樣品中可以得到比常規顯微鏡更清晰的圖像(光學切片圖像),并且即使在沒有厚度的樣品中也可以獲得具有稍微改善的分辨率的圖像。
激光掃描樣品,最后獲得整個圖像。每個像素的亮度通常與所獲得的熒光強度成正比。光束掃描由伺服控制鏡執行。該掃描方法的反應延遲小。如果降低掃描速度,則可以獲得噪聲較小的高分辨率圖像。可以通過上下移動顯微鏡平臺從多個焦平面收集信息。通過疊加多個焦平面的二維圖像,計算機可以創建標本的三維圖像。
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