在化學中，酰基化（或烷酰化）是將酰基（R-C=O）添加到一個化合物中的化學反應。提供酰基的化合物被稱為酰化劑。由于它們在與一些金屬催化劑處理時形成強烈的親電子性，酰基鹵化物通常被用作酰化劑。例如，Friedel-Crafts酰化反應使用乙酰氯（乙酰氯或CH3COCl）作為劑，氯化鋁（AlCl3）作為催化劑，向苯添加乙酰（乙酰基）。這個反應的機制是親電芳香族取代。酰基鹵化物和羧酸的酸酐也是常用的酰化劑。在某些情況下，活性酯表現出相當的反應性。所有這些都與胺反應形成酰胺，與醇反應通過親核酰基取代形成酯。酰化反應可用于防止通常在烷基化中發生的重排反應。要做到這一點，需要進行酰化反應，然后通過克萊門森還原法或類似的過程去除羰基。

蛋白質的酰基化是通過酰基連接的官能團對蛋白質進行翻譯后修飾。蛋白質酰化已被觀察到是控制生物信號傳遞的一種機制。

一個突出的類型是脂肪酰化，即脂肪酸添加到特定的氨基酸（如肉豆蔻酰化、棕櫚酰化或棕櫚酰化）。不同類型的脂肪酸參與全球蛋白質酰化。棕櫚酰化是一種酰基化類型，其中單不飽和脂肪酸棕櫚油酸被共價連接到蛋白質的絲氨酸或蘇氨酸殘基。棕櫚酰化似乎在Wnt蛋白的運輸、靶向和功能方面發揮了重要作用。