什么是固定化酶
編輯固定化酶是一種附著在惰性、不溶性材料上的酶,如海藻酸鈣(由海藻酸鈉溶液和酶溶液與氯化鈣的混合物反應產生)。這可以提供對條件變化(如pH值或溫度)的更大抵抗力。它還可以讓酶在整個反應過程中被固定住,之后它們很容易從產品中分離出來,并可以再次使用--這是一個更有效的過程,因此被廣泛用于工業中的酶催化反應。酶固定化的另一種方法是全細胞固定化。
商業用途
編輯固定化酶對商業用途非常重要,因為它們對反應的費用和過程有許多好處,其中包括。方便。溶解在反應中的蛋白質數量極少,所以工作起來更容易。完成后,反應混合物通常只包含溶劑和反應產物。經濟性。固定化的酶很容易從反應中移除,因此很容易回收生物催化劑。這在生產無乳糖牛奶等過程中特別有用,因為牛奶可以從容器中排出,留下里面的酶(乳糖酶)準備用于下一批產品。穩定性。固定化酶通常比可溶性酶有更大的熱穩定性和操作穩定性。在過去,生物洗衣粉和洗滌劑含有許多蛋白酶和脂肪酶,可以分解污垢。然而,當這些清潔產品接觸到人體皮膚時,它們會產生過敏反應。這就是為什么酶的固定化很重要,而不僅僅是經濟上的。
酶的固定化
編輯有多種方法可以使酶固定化。親和力-標簽結合。酶可以用非共價或共價的蛋白質標簽固定在一個表面上,如多孔材料中。這項技術已被確立為蛋白質純化的目的。這種技術是普遍適用的,可以在不事先進行酶的純化的情況下進行,其結果是純的制劑。使用多孔玻璃及其衍生物,其中多孔表面可以在疏水性方面進行調整以適應有關的酶。在玻璃、海藻酸珠或基質上的吸附。酶被吸附在惰性材料的外面。一般來說,這種方法是這里所列的方法中最慢的。由于吸附不是化學反應,固定化的酶的活性位點可能被基質或珠子阻擋,xxx降低了酶的活性。包埋法。酶被困于不溶性的珠子或微球中,如海藻酸鈣珠子。然而,這些不溶性物質阻礙了底物的到來,以及產物的排出。交聯。酶分子相互共價鍵合,形成一個幾乎只由酶組成的矩陣。該反應保證了結合部位不覆蓋酶的活性部位,酶的活性只受不動的影響。然而,共價鍵的不靈活性排除了化合吸附的自組裝單層所表現出的自我修復特性。在這種情況下,使用像聚乙二醇這樣的間隔分子有助于減少底物的立體阻礙。共價鍵:酶被共價地結合到不溶性支持物(如硅膠或帶有環氧化物基團的大孔聚合物珠)。這種方法提供了xxx的酶/支持物的相互作用,因此在催化過程中蛋白質的泄漏最低。隨機與定點的酶固定化眾多具有生物技術重要性的酶已經通過隨機的多點附著固定在各種支持物(無機、有機、復合和納米材料)上了。然而,通過隨機化學修飾的固定化導致了異質性的蛋白質群,其中存在于蛋白質中的一個以上的側鏈(氨基、羧基、硫醇等)與支持物相連,由于限制了底物進入活性位點而可能降低活性。
相反,在位點導向的酶固定化中,支持物可以與蛋白質分子中遠離活性位點的單個特定氨基酸(一般是N端或C端)相連。這樣一來,由于底物可以自由進入活性位點,xxx的酶活性得以保留。這些策略主要是化學性的,但也可能需要用遺傳和酶學方法在支持物和酶上產生功能團(蛋白質中沒有的)。SDCM方法的選擇取決于許多因素,如酶的類型(不太穩定的親心性,或更穩定的嗜熱性同源物)、酶的pH值穩定性、試劑的N端或C端可用性、酶端不干擾酶的活性、催化氨基酸殘基的類型、試劑的可用性、價格和制備的簡易性。
內容由匿名用戶提供,本內容不代表www.gelinmeiz.com立場,內容投訴舉報請聯系www.gelinmeiz.com客服。如若轉載,請注明出處:http://www.gelinmeiz.com/160850/