多重聚合酶鏈式反應
編輯多重聚合酶鏈式反應 (Multiplex PCR) 是指使用聚合酶鏈式反應同時擴增多個不同的 DNA 序列（就像在一個反應中一起執行許多單獨的 PCR 反應一樣）。 該過程在熱循環儀中使用多個引物和溫度介導的 DNA 聚合酶擴增樣品中的 DNA。 必須優化所有引物對的引物設計，以便所有引物對在 PCR 期間可以在相同的退火溫度下工作。
多重 PCR 于 1988 年首次被描述為一種檢測肌營養不良蛋白基因缺失的方法。 它也被用于類固醇硫酸酯酶基因。 2008 年，多重 PCR 被用于分析微衛星和 SNP。 2020 年，設計了 RT-PCR 多重檢測，將疾病與控制中心的多個基因靶標結合在一個反應中，以提高 SARS-CoV-2 診斷的分子檢測可及性和通量。
多重 PCR 由單個 PCR 混合物中的多個引物組組成，以產生對不同 DNA 序列具有特異性的不同大小的擴增子。 通過同時針對多個序列，可以從單次測試運行中獲得額外的信息，否則將需要數倍的試劑和更多的時間來執行。 必須優化每個引物組的退火溫度以在單個反應中正常工作，并且擴增子大小（即它們的堿基對長度）應該足夠不同以在通過凝膠電泳可視化時形成不同的條帶。 或者，如果擴增子大小重疊，則可以使用用不同顏色熒光染料染色的引物來區分和可視化不同的擴增子。 用于 PCR 的商業多路復用試劑盒可供使用，并被許多法醫實驗室用來擴增降解的 DNA 樣本。
應用
編輯多重 PCR 的一些應用包括：
- 病原體鑒定
- 高通量 SNP 基因分型
- 突變分析
- 基因缺失分析
- 模板定量
- 連鎖分析
- RNA 檢測
- 法醫研究
- 飲食分析
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