線性二色性
編輯線性二色性 (LD) 或衰減是平行偏振光和垂直于取向軸偏振光的吸收之間的差異。 它是一種材料的特性,其透射率取決于入射到其上的線性偏振光的方向。 作為一種技術,它主要用于研究分子的功能和結構。 LD 測量基于物質與光之間的相互作用,因此是電磁光譜的一種形式。
這種效應已應用于整個 EM 光譜,其中不同波長的光可以探測許多化學系統。 目前 LD 的主要用途是研究生物大分子(例如 DNA)以及合成聚合物。
基本信息
編輯線性極化
LD 使用線偏振光,即僅在一個方向上偏振的光。 這會產生一個波,即電場矢量,它僅在一個平面內振蕩,當光穿過空間時會產生經典的正弦波形狀。 通過使用平行于和垂直于取向方向的光,可以測量分子的一個維度相對于另一個維度吸收了多少能量,從而為實驗者提供信息。
當光與被研究的分子相互作用時,如果分子開始吸收光,那么隨著電子被光激發,分子內的電子密度將發生變化。 這種電荷運動稱為電子躍遷,其方向稱為電躍遷極化。 LD 正是針對此屬性進行測量的。
定向分子的 LD 可以使用以下等式計算:-
LD = A║- A┴
其中 A║ 是平行于取向軸的吸光度,A┴ 是垂直于取向軸的吸光度。
請注意,任何波長的光都可用于生成 LD 信號。
因此,生成的 LD 信號對可生成的信號有兩個限制。 對于電躍遷平行于取向軸的化學體系,可寫出如下方程:
LD = A║- A┴ = A║ > 0
對于大多數化學系統,這表示在分子長度上極化的電躍遷(即平行于取向軸)。
或者,可以發現電子躍遷極化完全垂直于分子的方向,從而產生以下等式:
LD = A║- A┴ = - A┴ < 0
該等式表示如果電躍遷在分子寬度上極化(即垂直于取向軸)時記錄的 LD 信號,在 LD 的情況下,它是兩個可研究軸中較小的一個。
因此,LD 可以以兩種方式使用。 如果分子在流動中的方向已知,那么實驗者可以觀察分子中的極化方向(這可以深入了解分子的化學結構),或者如果極化方向未知,則可以用作 一種計算分子流動方向的方法。
紫外線性二色性
編輯紫外 (UV) LD 通常用于分析生物分子,尤其是大的、柔性的、長的分子,這些分子被證明難以通過 NMR 和 X 射線衍射等方法進行結構確定。
基因
DNA 幾乎非常適合 UV LD 檢測。 分子很長很細,很容易在流動中定向。 這會產生強烈的 LD 信號。 使用 UV LD 研究的 DNA 系統包括 DNA-酶復合物和 DNA-配體復合物,后者的形成很容易通過動力學實驗觀察到。
纖維蛋白
纖維蛋白,例如與阿爾茨海默氏病有關的蛋白質和朊病毒蛋白,它們是一類長而薄的分子,可滿足 UV LD 的要求。 此外,還可以使用 LD 測量細胞骨架蛋白。
膜蛋白
使用 LD 監測膜蛋白插入脂質膜,為實驗者提供有關蛋白質在不同時間點相對于脂質膜的方向的信息。
此外,其他類型的分子已通過 UV LD 進行了分析,包括碳納米管及其相關的配體復合物。
對齊方式
編輯庫埃特流
Couette 流動定向系統是最廣泛使用的 UV LD 樣品定向方法。 它具有許多特性,使其非常適合作為樣本對齊的方法。 Couette 流是目前xxx確定的在溶液相中定向分子的方法。 該方法還只需要非常少量的分析樣品 (20 - 40 μl) 即可生成 LD 光譜。 樣品的持續再循環是系統的另一個有用特性,允許多次重復測量。
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