磷酸鹽緩沖生理鹽水
編輯酸堿鹽緩沖生理鹽水(PBS)是生物學研究中常用的緩沖溶液(pH~7.4)。 它是一種水基鹽溶液,含有磷酸氫二鈉、氯化鈉,在某些配方中還含有氯化鉀和磷酸二氫鉀。 緩沖液有助于保持恒定的 pH 值。 溶液的滲透壓和離子濃度與人體的滲透壓和離子濃度相匹配(等滲)。
應用
編輯PBS 具有許多用途,因為它是等滲的并且對大多數細胞無毒。 這些用途包括物質稀釋和細胞容器沖洗。 含 EDTA 的 PBS 也可用于分離附著和聚集的細胞。 然而,不能添加二價金屬如鋅,因為這會導致沉淀。 對于這些類型的應用,推薦使用 Good 的緩沖器。 在 SARS-CoV-2 等 RNA 病毒的運輸和儲存方面,PBS 已被證明是一種可接受的病毒運輸介質替代品
準備
編輯有許多不同的方法來制備 PBS 溶液(其中之一是 Dulbecco 的磷酸鹽緩沖鹽水 (DPBS),其成分與標準 PBS 不同)。 有些配方不含鉀和鎂,而其他配方則含有鈣和/或鎂(取決于緩沖液是用于活組織還是固定組織:后者不需要 KCl 或 MgCl2)。
從 800 mL 蒸餾水開始溶解所有鹽類。 加入蒸餾水至總體積為 1 升。 生成的 1× PBS 的終濃度為 157 mM Na+、140mM Cl-、4.45mM K+、10.1 mM HPO42-、1.76 mM H2PO4-,pH 值為 7.96。 添加 2.84 mM HCl 將緩沖液轉移至 7.3 mM HPO42? 和 4.6 mM H2PO4?,最終 pH 值為 7.4,Cl? 濃度為 142 mM。
PBS 的 pH 值約為 7.4。 制備緩沖溶液時,xxx始終使用 pH 計直接測量 pH。 如有必要,可使用鹽酸或氫氧化鈉調節 pH 值。
PBS 也可以通過使用商業生產的 PBS 緩沖片或袋來制備。
如果用于細胞培養,可將溶液分裝成等分試樣并通過高壓滅菌或過濾進行滅菌。 根據其用途,可能不需要滅菌。 PBS 可在室溫或冰箱中保存。 然而,濃縮儲備液在冷卻時可能會沉淀,應在室溫下保存直至沉淀物完全溶解后再使用。
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